La cisticercosis humana es una enfermedad parasitaria que ocurre como consecuencia de las infeccion por el estado larvario de Tnia solium, la cual se produce cuando el hombre se convierte en forma accidental en el huesped intermediario de dicho cestodo. El parasito tiene una predisposicion particular para afectar el sistema nervioso central y condicionar una enfermedad pleomor.ca denominada neurocisticercosis, que representa una patologia neurologica comun asi como un problema de salud publica en diferentes paises de America Latina, Africa y Asia.1 Por otra parte, el aumento reciente en el turismo, los grandes movimientos de refugiados y la inmigracion masiva de individuos provenientes de areas endemicas ha condicionado un aumento en la frecuencia de la neurocisticercosis en paises desarrollados, donde esta entidad era considerada una rareza en las ultimas decadas.2

Los costos de cuidados medicos como hospitalizacion, quimioterapia, neurocirugia y tomografia computarizada demuestran que en Mexico se gastaron $14.5 millones de dolares durante 1986 para tratar unicamente 2 700 nuevos casos hospitalizados con esta enfermedad. Mas aun, la cisticercosis porcina es considerada un grave azote economico debido al decomiso de carne infectada. En 1980, alrededor de $34 millones de dolares se perdieron en Mexico por este motivo: el equivalente de 68.5% de las inversiones en la produccion de ganado porcino.2

Se obtuvieron muestras de 12 sueros y 9 liquidos cefalorraquideos de personas con cisticercosis cerebral confirrmada mediante la tomografia axial computarizada por medio de punción venosa y cefalorraquidea, en hospitales y con el consentimiento de las personas afectadas. Como controles negativos se obtuvieron 3 líquidos cefalorraquideos y 12 muestras de sueros humanos sin antecedentes de cisticercosis; 11 sueros  humanos con otras parasitosis (ascariasis, amibiasis, unicnariasis, oncocercosis y malaria), confirmados por medio de los examenes diagnosticos de rutina. Todas las muestras fueron conservadas en timerosal al 0.01% y congeladas a .60¨¬ C hasta su uso.

Para la preparacion del antigeno de larvas de T©¡nia solium se utilizaron cisticercos que fueron obtenidos, por disección, de los músculos de cerdos infectados, y guardados a 60°C hasta su uso. El extracto total fue preparado por homogenización en vidrio ( potter) de los cisticercos completos, con una solución amortiguadora de fosfatos (PBS) de pH 7.2. Esta preparación antigenica fue utilizada para demostrar los anticuerpos presentes en el suero de los individuos infectados.

La identificación de los antigenos de Taenia solium por las inmunoglobulinas de pacientes infectados se llevo a cabo mediante la electroforesis en geles de acrilamida (SDS-PAGE) al 12%, siguiendo la técnica descrita por Laemi y modi.cada por Studier para geles en placa,3 y la inmunoelectroforesis IET descrita por Towing et al.

Se corrieron marcadores de pesos moleculares como la B galactosidasa (116 kDa), fosforilasa B (97 kDa), albumina serica bovina (67 kDa), ovoalbumina (43 kDa), anhidrasa carbonica (30 kDa) y lisozima (15kDa), con el .n de establecer una comparación de las movilidades electroforeticas relativas de las proteínas  del extracto antigenico con las proteínas con pesos moleculares conocidos.6 Las proteínas del extracto antigenico transferidas al papel de nitrocelulosa fueron probadas contra los sueros y líquidos cefalorraquideos de los pacientes con cisticercosis, así como contra los de otros individuos con otras parasitosis y sueros humanos normales.

Se identificó el numero y posición de las bandas reveladas en cada tira y se hicieron patrones para cada isotipo de inmunoglobulinas para su análisis y comparación posterior, entre el grupo de muestras de los individuos con cisticercosis y el grupo control.

Reconocimiento de antigenos por la inmunoglobulina G Todos los sueros de los individuos con cisticercosis presentaron anticuerpos de la clase IgG, los cuales reconocieron antigenos con pesos moleculares relativos entre los 15 y 220 kDa.

Esta inmunoglobulina fue la que reconoció el mayor numero de bandas antigenicas (30 bandas), en comparación con los otros tipos de inmunoglobulinas. El mayor numero de bandas compartidas por los sueros de los individuos con cisticercosis, se presento en la región de aproximadamente 100-59 kDa; por debajo de los 50 kDa se observan 5 bandas de 30, 29, 28, 20 y 15 kDa que fueron las mas reconocidas.

En relación con el reconocimiento inespecífico, los sueros de las personas con diferentes parasitosis y los sueros humanos normales presentaron reacciones cruzadas con diferentes intensidades. Aunque el numero de bandas reconocido por los sueros con diferentes parasitosis fue menor que en el grupo de las personas con cisticercos, en conjunto logran identificar la mayoría de los antigenos reconocidos por los sueros de los pacientes cisticercosos. El suero que mas reacciones cruzadas presento corresponde al de una persona con oncorcercosis, y fue el unico del grupo control negativo que reconoció el antigeno de peso molecular de 20 kDa.

Los antigenos espeíficos que no fueron reconocidos por los sueros controles negativos correspondieron a los antigenos de 20 y 15 kDa en la región de pesos moleculares bajos (Figura 2).

El patrón de reconocimiento de la IgG en los líquidos cefalorraquideos de las personas con cisticercosis presento una distribución semejante a la obtenida en sueros. Los antigenos que fueron detectados con mayor intensidad corresponden a los 68, 45 y 35 kDa, los cuales fueron reconocidos por la totalidad de los controles negativos; los antigenos de pesos moleculares bajos de 15 y 20 kDa fueron reconocidos únicamente por 5 de los 9 líquidos cefalorraquideos de personas positivas a cisticercosis, y por ninguno de los líquidos de las personas negativas (Figura 3).

Reconocimiento de antigenos por la inmunoglobulina M Esta inmunoglobulina revelo un patrón de respuesta heterogenea de los sueros de las personas con cisticercosis y reconoció un total de 13 bandas antigenicas, la mayoría con pesos moleculares relativos entre los 90-30 kDa. Esta inmunoglobulina fue la que reconoció menor numero de bandas antigenicas, muchas de ellas de manera muy sutil, y la que presento el mayor fondo en los inmunorrevelados, lo que dificultó su comparación.

El patron de reconocimiento por esta inmunoglobulina en el liquido cefalorraquideo de las personas con cisticercosis revelo una imagen con nueve bandas reconocidas entre los 90-30 kDa de peso molecular relativo. Este patrón fue idéntico al observado en los sueros analizados.

Reconocimiento de antigenos por la inmunoglobulina A El patrón del extracto antigenico demostrado por la inmunoglobulina A en los sueros de las personas con cisticercosis revelo 18 bandas, la mayoría localizadas entre los 90-30 kDa. En esta región, esta inmunoglobulina presento un reconocimiento antigenico prácticamente similar, tanto en numero como en intensidad de bandas, entre los sueros negativos y en los sueros de los pacientes cisticercosos.

El reconocimiento de los antigenos del cisticerco por la inmunoglobulina A en los líquidos cefalorraquideos de los individuos con cisticercosis, fue similar en lo general a lo obtenido en los sueros probados, ya que reconocieron el 90% de los antigenos correspondientes.

Reconocimiento de antigenos por la inmunoglobulina E Esta inmunoglobulina reconoció 17 antigenos, distribuidos entre los 120 y 15 kDa de peso molecular relativo; en la región de 67-120 kDa se observaron  por la mayoría de los sueros de pacientes cisticercosos.

El patrón de reconocimiento de la IgE, en los líquidos cefalorraquideos, es muy semejante al obtenido con los sueros probados en la región de 120-35 kDa, contrariamente a lo encontrado en los sueros; debajo de esta zona no fue posible observar ningún antigeno revelado (Figura 5).

En este estudio, el porcentaje de pacientes confirmados con cisticercosis que poseían anticuerpos anticisticerco fue de 100%; algunos estudios previos reportan el 44% de positividad utilizando la inmunoelectroforesis;7 otros señalan una positividad de 79 mediante la prueba de ELISA,8 el 77% en los sueros y un 50% en los líquidos cefalorraquideos, mediante la prueba de ELISA.9 Sin embargo, las diferencias de la población bajo estudio, así como las técnicas utilizadas y el mayor poder de resolución de la inmunoelectrotransferencia, podrían explicar estas diferencias.

Por otra parte, los anticuerpos presentes en los sueros utilizados como controles negativos reaccionaron inespecificamente con algunos antigenos de larvas de Taenia solium, especialmente en la region comprendida entre los 90 y 35 kDa. Esto puede deberse a que los donantes de estos sueros y líquidos cefalorraquideos pudieron haber tenido infecciones bacterianas y parasitarias que dieron lugar a las reacciones cruzadas. Lo anterior fue con.rmado por el reconocimiento de los mismos antigenos, por las muestras analizadas de los pacientes con diferentes parasitosis.

Esta situacion con.rma la teoria de que para la supervivencia en los huéspedes susceptibles, los parásitos sintetizan antigenos filogeneticamente muy conservados e inespecíficos a .n de distraer la respuesta inmune de los huéspedes. Este hecho, por otro lado, es comun en las pruebas inmunologicas de gran sensibilidad, de ahí la importancia de reconocer los antigenos específicos de cada uno de los parásitos estudiados.

En este estudio se encontraron dos antigenos inmunodominantes con pesos moleculares de 68 y 45 kDa. Asi, se observo que todos los individuos estudiados presentaron anticuerpos detectables contra ellos y que además indujeron la producción de mas de un tipo de inmunoglobulina.

Un estudio mas reporto la presencia de un polipeptido de peso molecular de 81 kDa que es reconocido por anticuerpos IgE.10 En el presente estudio fue posible observar un antigeno de las mismas características y con un peso molecular muy semejante (110 kDa). Durante los últimos anos, varios estudios inmunologicos han enfatizado la importancia de esta inmunoglobulina en las infecciones por parasitos y el papel que juega para el reconocimiento específico de ellos. Por otra parte, estudios previos también indican que la mayor especificidad de los antigenos parasitarios reside en los pesos moleculares bajos. No es sorprendente, así, que la mayor especificidad encontrada en este estudio resida en los pesos moleculares bajos (20 y 15 kDa) reconocidos tanto por la IgE como por la IgG.

La baja sensibilidad de las inmunoglobulinas en los líquidos cefalorraquideos hacia los antigenos de peso molecular bajo, puede ser atribuible a su baja concentración. Es sabido que en este liquido, la concentracion de las inmunoglobulinas y de las proteínas en generales es mucho menor que en el suero (0.14-0.45 g/l en el liquido cefalorraquideo en comparación de 0.7.17 g/100 ml de gammaglobulinas en el suero),11 de tal suerte que las presentes, o la gran mayoría de ellas, están dirigidas hacia los antigenos inespecíficos pero al mismo tiempo inmunodominantes.

Esto no quiere decir que no existan, pero si que su detección ofrece dificultades. A pesar de esto, la inmunoglobulina G, predominante por su concentración normal en los sueros y su amplio reconocimiento de los antigenos de larvas de Taenia solium, detecto en 5 de 9 líquidos cefalorraquideos los antigenos de 15 y 20 kDa. En otro estudio se reporto 94% de positividad en pacientes con cisticercosis utilizando el radioinmunoensayo; sin embargo, las reacciones cruzadas alcanzaron 30%.

Referencias

1. Mahajan RC, Flisser A et al. Geographical distribution of human cysticercosis. In: Cysticercosis: present state of knowledge and perspectives. New York Academic Press, 1982; 39-45

2. Flisser A, Bulnes I, Diaz y cols. Estudio seroepidemiologico de la cisticercosis humana en poblaciones predominantemente indigenas y rurales del estado de Chiapas. Arch Inv Med IMSS 1976; 7; 107-113

3. Studier RW. Analysis of bacteriophate T 7 early RNAs and proteins on slab gel. J Mol 1973; 79: 237

4. Towbin H, Staehelin T, Gordon J. Electrophoretic transfer of protein from polyacrilamide gels to nitrocellulose sheets. Proc Nat Acad Sci 1979; 76: 4350

5. Gong A, Postel W et al. Horizontal SDS electrophoresis in ultrathin pore-gradiente gels for the analysis of urinary proteins. Science Tools 1985; 32: 1

6. Cabrera ZM, Cooper RM, Parkhouse. Differential recognition patterns of human inmunoglobulin classes to antigens of Onchocerca gibson. Trop Med Parasit 1986; 37

7. Flisser A, Perez M, Larralde C. The immunology of human and animal cysticercosis: a review. Bull WHO 1979; 57: 839-856

8. Diwar AR, Coker-Van M et al. Enzymelinked inmunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibody to cysticerci of Taenia solium. Am J Trop Med 1982; 364-369

9. Tellez G, Ramos E et al. Detection of Cysticercus cellulosae antigens in cerebrospinal fluid by dot enzyme linked immunosorbent assay (DOT ELISA) and standard ELISA. Am J Trop Med 1987; 37: 169-173

10. Grols M, Estrada J et al. Antigen-antibody analysis in neurocysticercosis. J Parasit 1985; 7 (14) 433-442

11. Harrison. Principles of Internal Medicine. Isselbacher. Adams. Braunwald, Petersrdorf and Wilson McGraw-Hill 323-327

12. Mohammad I, Heiner D et al. Enzymelinked immunosorbent assay for the diagnostic of cerebral cysticercosis. Journal of Clinical Microbiology 1984; 20: 775-779